基于sgRNA的相關問題討論

1、Q:請教老師，我設計的sgRNA?與非靶序列相似度多大時會把這個非靶標基因也編輯了？是否可以理解為：在遠離pam端有4個及以內的與靶序列不同堿基的序列都是可以被編輯的。即脫靶到了那些序列。A:有脫靶機會，但通常識別活性會比較低，一般地，脫靶是需要盡量避免的。如果想要敲除兩個以上基因，需要針對要敲除的基因分別設計crispr以制備不同的sgRNA。?2.Q:crispr/Cas13在gRNA設計

基因編輯質粒的相關問題討論-南京堯順禹斑馬魚基因編輯

基于基因編輯質粒的相關問題討論1、Q:利用crsipr敲除，可以用瞬轉質粒嘛？A:可以！這樣做得到的細胞是mosaic，即有的細胞是基因組編輯了，有的則沒有；有的細胞基因敲除了，有點則沒有。如果只要改變部分細胞基因即可的話，則可以通過瞬轉，如以原代細胞為研究對象。?2、Q:保存領到的質粒和菌液，說明書上說質粒保存溫度-20℃/-80℃，怎么決定？我把領到的裝質粒和菌液的離心管插到一個管插上直接放進

斑馬魚模型在化妝品研究中的運用（南京堯順禹基因編輯斑馬魚模型、毒理研究）

化妝品已成為人們生活中的必需品，安全性和功效性評價是化妝品研發(fā)過程中非常重要的一個環(huán)節(jié)。斑馬魚具有傳代時間短、飼養(yǎng)方便、價格低廉以及便于大規(guī)模篩選等優(yōu)勢，是一種有效、可靠、高通量的模式生物。目前，對斑馬魚致死和致畸的統計結果可用于化妝品原料的安全性評價和防曬劑抗紫外線的功效評價，其身體表面黑色素數量的變化可用于斑類白原料的功效評價，均呈現出良好的發(fā)展優(yōu)勢和應用前景。用斑馬魚評價化學品等健康安全的實